協同生物(wù)
肝癌模型所使用(yòng)的(de)實驗動物(wù)涉及小鼠、大(dà)鼠、豚鼠，模型種類主要分(fēn)爲化(huà)學誘導、飲食誘導、移植瘤以及多(duō)種方法聯合使用(yòng)。本文主要介紹通(tōng)過化(huà)學和(hé)飲食誘導的(de)小鼠模型。
化(huà)學誘導模型
化(huà)學誘導模型的(de)優點是與人(rén)類的(de)損傷-纖維化(huà)-惡性循環相似。目前發現的(de)緻癌化(huà)合物(wù)有很多(duō)，其主要被分(fēn)爲以下(xià)兩種類型: ①遺傳毒性緻癌物(wù)，直接導緻DNA損傷，如二乙基亞硝胺( N-nitrosodiethylamine，DEN) 、黃(huáng)曲黴毒素 B(Aflatoxin B1， AFB) 、四氯化(huà)碳( Carbon tetrachloride ，CCl4) 和(hé)硫代乙酰胺(Thioacetamide ，TAA 等; ②非遺傳毒性緻癌物(wù)，促進缺乏直接作用(yòng)遺傳物(wù)質的(de)能力，但在由肝毒性化(huà)合物(wù)引發後增強腫瘤形成的(de)化(huà)合物(wù)，如苯巴比妥(phenobarbital，PB) 、過氧化(huà)物(wù)酶體增生劑(Peroxisome proliferators ，PPs) 等。
飲食誘導模型
通(tōng)過蛋氨酸膽堿缺乏飼料（MCD）誘導更嚴重的(de)病變，其特征是1-2周内出現急性胰腺炎和(hé)8-10周的(de)肝纖維化(huà)。爲了(le)顯著減少緻癌時(shí)間，乙硫氨酸（ethionine），一種非蛋白質性細胞毒性甲酸模拟物(wù)，可(kě)以添加到膽堿缺乏飼料中（CDE），喂養2周就可(kě)誘導肝祖細胞的(de)強烈增殖和(hé)肝星狀細胞的(de)活化(huà)，從而引起嚴重的(de)肝髒炎症。還(hái)有其它方式的(de)飲食誘導，例如西方飲食誘導的(de)肥胖綜合症模型、非酒精性脂肪肝（NAFLD）動物(wù)模型等。
飲食、化(huà)學誘導相關的(de)工程小鼠
通(tōng)過改變條調控肝癌細胞生長(cháng)、周期、發育等進展的(de)基因可(kě)以誘導腫瘤，例如c-Myc、Wnt/β-catenin、APC、PTEN等。基因工程小鼠包括組成型表達、選擇性表達、以及誘導性表達。組成型表達系統，例如完全整合了(le)乙型肝炎病毒X蛋白HBx基因的(de)轉基因小鼠；選擇性表達系統，例如利用(yòng)Cre/loxP重組系統構建的(de)Alb/c-myc和(hé) MT/TGF-α轉基因小鼠；誘導性表達系統，例如利用(yòng)四環素調控基因表達系統構建的(de)LAP-tTA和(hé)TRE-MYC小鼠。
基因工程小鼠飲食+化(huà)學試劑誘導操作方法
LAP-tTA和(hé)TRE-MYC小鼠，在去除雙轉基因小鼠飲用(yòng)水(shuǐ)中的(de)強力黴素(100μg/ml)後，肝髒MYC表達被激活；C57BL/6小鼠以20μg/g體重腹腔注射二乙基亞硝基胺(DEN)建立化(huà)學誘導性HCC。12周齡雄性B6.Cg-Lepob/J (ob/ob) 小鼠在特定時(shí)間喂食蛋氨酸膽堿缺乏飼料（MCD）、膽堿缺乏氨基酸飼料（CDAA）、高(gāo)脂肪飼料（HF），誘導NAFLD，MCD飼料中添加玉米油(10%)，不添加魚油。改良後的(de)飼料以AIN-76A标準飼料爲基礎，熱(rè)量等高(gāo)(4.45千卡/克)，脂肪含量相同(23%)。以不同比例供應富含亞油酸的(de)紅花油和(hé)含飽和(hé)脂肪酸的(de)椰子油，低亞油酸飲食含量爲2%，高(gāo)亞油酸飲食含量爲12%。采用(yòng)高(gāo)亞油酸或低亞油酸飼喂C57BL/6小鼠4周。
MYC過表達的(de)小鼠，MCD/CDAA/HF飼料喂養，給予或是不給予DEN喂養。
